激光共聚焦顯微鏡對測試的樣品要求高不高

激光共聚焦顯微鏡作為一種高分辨顯微鏡，對測試的樣品有一定的要求，這些要求確保了測試的準確性和儀器的正常運行。以下是對激光共聚焦顯微鏡測試樣品要求的詳細歸納：

一、生物樣品要求

熒光表達：生物樣品應先在熒光顯微鏡下觀察熒光表達是否正常，以確定是否有必要使用激光共聚焦顯微鏡。

蓋玻片厚度：蓋玻片厚度要求≤0.17mm，以確保激光能夠穿透並正確聚焦在樣品上。

激發與發射波長：需要明確樣品的激發波長和發射波長，以便選擇合適的激光器和熒光染料。

掃描參數：對於需要重構的樣品，需要明確掃描區域大小、位置和Z步進等參數，這些參數會影響測試時間。

樣品固定：共聚焦顯微鏡測試的標本需要貼壁良好，不能懸浮起來，需要在載玻片上固定好後進行測試。

抗熒光淬滅：做顯微成像時，樣品需要加抗熒光淬滅劑，以防止熒光信號丟失。

二、材料樣品要求

樣品製備：主要測試偏材料的樣品，需要提前製備好。

樣品尺寸：樣品拍出來*大麵積為1.11×1.8mm到5×5mm範圍內，顏色可調。樣品的尺寸沒有嚴格要求，但B須平整，以確保激光能夠均勻照射。

三、通用要求

熒光探針標記：樣品需經熒光探針標記（單標、雙標、三標），以便激光共聚焦顯微鏡能夠檢測到熒光信號。

載玻片要求：載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間，且表麵應光潔、厚度均勻，沒有明顯的幹擾熒光。

樣品厚度：樣品不能太厚，如果太厚，激發光大部分會消耗在樣品下部，而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發。

封片劑選擇：封片劑常用PH8.5~9的PBS配製的甘油封片，或使用抗熒光淬滅的封片劑，以減少熒光信號丟失。

綜上所述，激光共聚焦顯微鏡對測試的樣品有一定的要求，這些要求涉及樣品的熒光表達、蓋玻片厚度、激發與發射波長、掃描參數、樣品固定、抗熒光淬滅、熒光探針標記、載玻片要求、樣品厚度以及封片劑選擇等方麵。這些要求確保了測試的準確性和儀器的正常運行。