你知道細胞培養用什麽樣顯微鏡更合適嗎？

你知道細胞培養用什麽樣顯微鏡更合適嗎？什麽是細胞培養

在體外模擬體內環境，人工控製無菌、溫度、酸堿度、氧氣與二氧化碳、營養條件等，使細胞正常生長、繁殖且保持主要結構與功能，這種技術可以使單個細胞經過控製培養成為大量的單細胞或者少分化的多細胞。

依據生長狀態分類，細胞培養一般分為貼附型和懸浮型

①貼壁型細胞：粘附是大多數有機體細胞在體內生長發育的基本存在形式，一方麵是細胞之間的相互接觸，另一表現是細胞外基質之間的結合，基於這種特性，細胞之間才能相互結合形成組織，在體外培養時，也需要固相界麵為細胞提供粘著點。

②懸浮型：屬於非貼壁依賴的細胞，通常也會發生細胞質膜與培養液底粘連，但麵積一般不超過5%。該類型細胞一般來自血液、骨髓或脾，尤以血中白細胞、癌細胞為主要代表，在懸浮液中生長狀態良好時，顯微視角下細胞一般呈圓形，單個或小細胞團。

培養的細胞依據光學顯微鏡下的形態，主要可分為以下幾類：

成纖維細胞型：一般起源於心肌，平滑肌，成骨細胞，血管內皮等細胞。細胞呈梭形、扇形、星形或不規則三角形，中央有卵圓形核，胞質常向外伸出3-5個長短不一的突起，生長時呈放射狀。細胞匯合過程中，細胞的生長呈放射狀、火焰狀或漩渦狀。

上皮細胞型：泛指形態上類似上皮細胞的培養細胞，起源於內、外胚層的細胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等，一般呈扁平、不規則多邊形，中央有圓形核，細胞外觀透明，細胞彼此緊密相連成單層生長，生長時呈膜狀移動，處於膜邊緣的細胞總與膜相連。

淋巴母細胞樣型：胞體一般呈圓形，直徑在幾微米到十幾微米不等，細胞漿量少，胞核大，核周屆界明顯，多見於急性淋巴細胞白血病等。與上述兩種形態類型細胞不同，該類型細胞不是貼壁生長，而是懸浮生長。

細胞培養的應用

生物體主要是由各種細胞組成的高度統一的整體，對單個細胞或某一種群細胞在體內的活動和功能進行研究是比較難實現的，細胞培養的意義在於，人工控製外界變量，一方麵可以研究細胞的代謝、衰老等過程、藥物等對細胞的影響；另一方麵，細胞培養可產生大量同類型的細胞群作為各類實驗樣本，保證結果一致性和可重複性。

目前細胞培養主要用於藥物篩選和開發，以及生物化合物（例如疫苗、治療性蛋白質）的大規模製造：

藥物作用機理研究：在培養的細胞中添加藥物作為變量，觀察研究藥物對細胞的作用機理與結果，進而作為藥物機理的一個判斷依據。

新藥篩選：如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分的篩選與鑒定等。

疫苗開發研究：如病毒性疫苗的研究與開發（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗（多肽疫苗）等。

基因工程藥物研究與開發：如幹擾素研究與開發，細胞生長因子研究與開發等。

細胞工程藥物研究與開發：生物活性多肽研究與開發，人參皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究與開發。

單克隆抗體製備：包括診斷用單克隆抗體，治療用單克隆抗體。

基因轉移（轉染）研究：向受體細胞中導入外源基因，改造細胞遺傳性狀。一種方式是在轉入的基因中添加熒光標記物，用以篩選出轉化細胞，這一步通常需要使用熒光顯微鏡進行篩選判斷標記的轉染細胞。

細胞培養成像難點

未經染料標記的活細胞透明度大，折光性強，輪廓不清，常規的明場觀察較難將其從培養液中區分開來，對於這類低反差的活細胞，需要使用相差觀察或霍夫曼調製相襯觀察等方法，使無色透明活細胞也能輕鬆被識別。

倒置顯微鏡更適合相差觀察

細胞培養需要各種專業設備，細胞房空間一般較為局促，超淨工作台留給細胞觀察的空間也非常有限，利用有限空間對於設備的小巧化和集約化提出了更高的要求。對於熒光顯微鏡，使用LED光源替代占地空間大的汞燈是十分必要的，小尺寸但集合多種觀察方式的活細胞成像儀對於有限空間的高效利用也是很好的解決方案。

對於工業化生產如疫苗、單克隆抗體、基因重組藥物等，需要使用細胞工廠之類的大規模培養，由於容器大小高度的限製，就要求顯微鏡有更大的載物台和工作空間尺寸。