顯微鏡生物玻片的製作可分為以下三步:
清洗生物玻片、製作塗片、製作裝片
一、生物顯微鏡切片清洗
顯微鏡標本切片的清洗將直接影響生產質量,因此製作顯微鏡標本切片的**步是清洗載玻片和蓋玻片。
新購買的生物玻片不可以直接用,要先在95%的酒精中浸泡,去除表麵的附著物,在使用前取出,晾幹或烘幹備用。
用過的舊生物玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮0.5h,冷卻後用軟刷刷掉汙垢,用自來水衝洗,放入95%酒精中備用。如果是石蠟切片,可以先在二甲苯中浸泡幾個小時(可以用製片時回收的廢棄二甲苯,既能避免環境汙染,又能節省實驗成本),溶解用於密封的樹膠,將蓋玻片和玻片分開,然後用肥皂水煮。
二、製作生物顯微鏡切片步驟
1)製作生物顯微鏡切片需要的材料有:蓋玻片、載玻片、解剖針、刀片、毛筆等
2)取材→切片→選片→固定與染色→脫水→透明→封片
1、取材完整;選擇標本應力求新鮮,如果內部構造發生糜爛,製片觀察會影響標本結構的完整。
2、切片時,切片和材料上都應不時地沾上水;動作要均勻有力,一刀切下,不得拉割或中途停頓。
3、在切完片子後,先把玻片放在30%酒精水溶液中,讓酒精的張力自動把皺摺展開,然後再將玻片移到熱水,這樣的片子會較薄;如酒精濃度過高,容易引起玻片破碎,出現裂隙,像脂肪之類細胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會散開,故不能用此法。
4、載玻片、蓋玻片要清洗幹淨。
5、把製作好的切片或者需要觀察的培養液滴進蒸餾水中。
6、拿著蓋玻片使用約四十五度的角慢慢放下,讓蓋玻片蓋住標本不要有氣泡,被擠出來的多餘的水用吸紙給吸幹這樣就算可以完成了。
7、封片時,樹膠滴加要適量,以蓋玻片蓋上時樹膠剛好擴散至其邊緣為宜;樹膠濃度也要適當,要既有一定的粘稠度又不能過於濃,可以在蓋玻片下緩緩散開為宜。