當生物顯微鏡含微粒或低原子序數的尤薄樣品成像時,因為顯微鏡彈性散射電子的比率很小,並且大部疏散射電子都在近軸區。因此用顯微鏡散射吸收的機理,不能夠有效給出充足襯度的圖畫。這便是基於行使電子微粒性成像法的規模性。因此人們想到乞助於電子顯微鏡的波動性。
從波動學說的角度,電子和樣品偏明顯微鏡的好處可給出透射波和散射波.若顯微鏡物鏡光闌能讓兩束或兩束以上的波同時通過,則顯微鏡中的像便是這些波經透鏡好處後,按必然相位關連幹預合成的結果。當相位條件適合時,散射波的振幅恰好可與透射波的振幅數值相加或相減,然後在生物顯微鏡圖畫上闡揚出響應的效果。因為顯微鏡樣品內的微結構決意了散射波的強弱分布,因此圖畫上就會發現不同的幹預強度。這種強度分布便是像的相位襯度。研究評釋,更佳相位條件要求顯微鏡物鏡處於某種離焦情況,而離焦量的大小應與物鏡的球差係數以及電子波長等相配。換句話說,這種成像技巧的特色是行使欠焦來補償物鏡的像差,然後顯赫進步電子顯微像的分辯率它。
人們能夠運用生物顯微鏡直接觀察固體中原子規範的微觀結構,取得遠遠勝過設想的更豐富的結構知識。這便是降生於本世紀七十年代的高分辯電子顯微學的基礎。高分辯電子顯微學的發展不但給材料科學、地質礦藏等固體科學帶來了新的方向,並且也為生命科學中至關重要的生物大分子結構的研究提供了強有力的方法。英國醫學委員會分子生物學試驗室的A.Klug博士在這方麵作出了出色的進獻。他把衍射道理和生物顯微鏡奇妙地結合起來,開展出一整套用電子計較機進行圖畫處理的技巧。
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